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BIOBASIC液相色譜柱峰拖尾原因

更新時(shí)間:2016-08-24      瀏覽次數(shù):2609
  
  
  A)BIOBASIC液相色譜柱污染
  
  如果色譜柱開(kāi)始使用時(shí)峰形正常,使用一段時(shí)間后逐漸出現(xiàn)峰拖尾,則色譜柱被污染的可能性很大,這時(shí)需要對(duì)色譜柱加強(qiáng)沖洗,即使用比方法流動(dòng)相更強(qiáng)的溶劑沖洗色譜柱。BIOBASIC液相色譜柱還可以反沖,反沖的沖洗效率比正著沖要更高。
  
  建議做好樣品前處理,但如果前處理后依然比較臟,強(qiáng)烈建議配置保護(hù)柱。一旦峰形變差,柱效下降,應(yīng)及時(shí)更換保護(hù)柱芯。
  
  B)柱外死體積
  
  較大的柱外死體積會(huì)導(dǎo)致峰形擴(kuò)展和峰拖尾,建議仔細(xì)檢查樣品經(jīng)過(guò)的所有管路及各連接部位,請(qǐng)使用合適的管線和接頭。
  
  C)樣品過(guò)載
  
  D)樣品溶劑過(guò)強(qiáng)
  
  樣品溶劑的強(qiáng)度應(yīng)不高于流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度。使用流動(dòng)相溶解樣品或使用比初始比例流動(dòng)相洗脫能力更弱的溶劑來(lái)溶解樣品。
  
  E)組分共流出
  
  如果一小峰包含在一大峰后面,這一共流出的峰會(huì)顯現(xiàn)為拖尾峰。需要做好色譜條件的優(yōu)化,有條件時(shí)可利用DAD檢查峰純度。
  
  F)流動(dòng)相的pH在樣品pKa附近
  
  流動(dòng)相的pH在樣品的pKa附近時(shí),樣品解離平衡不充分,容易出現(xiàn)前伸峰或拖尾峰。所以流動(dòng)相的pH應(yīng)盡量選在樣品pKa±1.5以外
  
  G)BIOBASIC液相色譜柱填料表面的惰性不夠好
  
  鍵合硅膠型填料表面的殘留硅羥基或金屬雜質(zhì)易與待測(cè)化合物發(fā)生二次作用而導(dǎo)致拖尾。
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